三维试验的检测原理是什么？如何操作？(微生物 耐药菌株)

答：三维试验的原理是：AmpC酶可使头霉素类抗菌药水解失活，致使细菌对其耐药。筛选试验：按纸片法药敏试验制备25ml M-H琼脂培养基平板。将0.5麦氏浊度的大肠埃希菌ATCC 25922菌液均匀地涂布于药敏平板。稍干后于平板中心贴一张30μg/片的头孢西丁纸片。用无菌手术刀片距上述纸片边缘5mm处以辐射状向平板边缘方向开3mm × 5mm横沟。用微量加液器吸取20～30μl待测菌的酶粗提液并由内向外小心地加入槽沟中，注意不要溢出。35℃培养过夜。次日观察沟槽和抑菌圈交界处出现抑菌圈缺损者，则为AmpC阳性。质控菌株为阴沟肠杆菌029M（AmpC酶高产株）和阴沟杆菌029 （AmpC酶诱导株）。