唾液腺肿瘤的基因治疗(概况)(口腔医学 唾液腺肿瘤的分子生物学)
随着对肿瘤病变机制研究的不断深入,目前认为肿瘤的发生、发展直接与基因的改变有关,因此有学者把肿瘤称为分子病或基因病。在肿瘤的治疗方面,随着对肿瘤发生发展的分子生物学机制的深入探究,肿瘤的治疗方法由传统的手术治疗、放疗、化疗逐步向分子水平转变。基因治疗作为生物治疗的一方面,也成为目前治疗肿瘤的重要研究方法。
肿瘤的基因治疗是肿瘤治疗研究中一项突破,它是伴随着DNA重组技术的成熟而发展起来的分子水平的治疗手段,通过纠正或补偿患者细胞中缺陷基因,关闭或抑制异常表达的基因,从而达到治疗目的的一种生物医学技术。
基因治疗的一般程序包括:①获得目的基因;②受体细胞的选择;③基因导入方法并合适载体的选择;④基因转移方法的选择,包括回体法即在体外将目的基因导入细胞内,再将这种细胞回输给患者,以及在体法即将外源基因直接导入体内有关的组织器官;⑤转导细胞的选择及鉴定。
获得成功的基因治疗必须具备以下几个条件:一是必须要有合成的载体将治疗基因导入靶细胞;二是必须保证基因导入细胞的效率;三是治疗基因的表达必须在适当的水平;四是基因载体及导入基因的表达对患者机体及环境是无损害的。
根据所采用的方法不同,基因治疗的策略大致可分为以下几种:
1.基因置换(gene replacement)
用正常的基因原位替换病变细胞内的致病基因,使细胞内的DNA完全恢复正常状态。这种治疗方法最为理想,但目前由于技术原因尚难达到。
基因修复(gene correction):指将致病基因的突变碱基序列纠正,而正常部分予以保留。这种基因治疗方式最后也能使致病基因得到完全恢复,操作上要求高,实践中有一定难度。
2.基因修饰(gene augmentation)
又称基因增补,将目的基因导入病变细胞或其他细胞,目的基因的表达产物能修饰缺陷细胞的功能或使原有的某些功能得以加强。在这种治疗方法中,缺陷基因仍然存在于细胞内。如将组织型纤溶酶原激活剂的基因导入血管内皮细胞并得以表达后,防止经皮冠状动脉成形术诱发的血栓形成。
3.基因失活(gene inactivation)
利用反义技术、核酶技术或基因敲除技术(knock-out)等封闭有害基因,能特异地封闭基因表达特性,抑制一些有害基因的表达,以达到治疗疾病的目的。如利用反义RNA、核酶或肽核酸等抑制一些癌基因的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,诱导肿瘤细胞的分化。用此技术还可封闭肿瘤细胞的耐药基因的表达,增加化疗效果。①反义核酸技术:用与目的基因或目的基因的mRNA互补的核酸,在复制、转录、翻译水平上抑制目的基因的表达。②核酶技术:利用核酶的催化活性将mRNA特异地剪切,从而不能承担翻译的模板作用。③基因敲除:利用外源性或内源性DNA片段,小干扰RNA和微小RNA等将细胞某特定基因去除或基因失活。
4.免疫调节(immune adjustment)
将抗体、抗原或细胞因子的基因导入患者体内,改变患者免疫状态,达到预防和治疗疾病的目的。如将白细胞介素-2导入肿瘤患者体内,提高患者IL-2的水平,激活体内免疫系统的抗肿瘤活性,达到防治肿瘤复发的目的。
5.“自杀”基因
增加肿瘤细胞对放疗或化疗的敏感性:采用给予前体药物的方法减少化疗药物对正常细胞的损伤力。如向肿瘤细胞中导入单纯疱疹病毒胸苷激酶基因,然后给予患者无毒性GCV药物,由于只有含HSV-TK基因的细胞才能将CGV转化成有毒的药物,因而肿瘤细胞被杀死,而对正常细胞无影响。