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感染性疾病的分子生物学检测技术主要有哪些?(微生物 病原微生物的分子诊断)

导语:感染性疾病的分子生物学检测技术主要有哪些?属于微生物下的病原微生物的分子诊断分支内容。本篇围绕微生物 感染性疾病的分子生物学检测技术主要有哪些?主题,主要讲述分子生物学诊断应用等方面医学知识。

一、直接检测特定细菌性病原体的技术:

①循环扩增技术:普通PCR(conventional polymerase chain reaction)、巢式PCR(nested PCR)、半巢式PCR(seminested PCR)、反转录PCR(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)、实时定量PCR (real-time PCR)。②等温扩增技术:包括转录依赖的扩增系统(tran scription-based amplification system,TAS)和链替代扩增反应(strand displacement amplification,SDA)两种不同的方法,其中转录依赖的扩增系统又包括了核酸序列依赖扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)、转录介导的扩增(transcription mediated amplification,TMA)、自主序列复制系统(self-sustained sequence replication,3SR)三种方法。③连接酶链反应:连接酶链反应(ligase chain reaction,LCR)是一种探针扩增技术,又称连接酶扩增反应(ligase amplification),其扩增对象不是目标的DNA片段,而是引物组成的探针。④信号放大扩增技术:主要包括分支DNA(branch DNA,bDNA)信号放大系统和杂交捕获系统(hybrid capture),此外,PCR-酶联免疫反应(PCR-ELISA)也可用于核酸信号的放大。

二、利用核酸杂交或质谱分析检测细菌性病原体 :

DNA杂交/探针分析(DNA-hybridization/probe assay)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、核酸肽-荧光原位杂交(peptide nucleic acid-FISH)、线性探针检测(line probe assay)、杂交保护测定(hybridization protection assay)、质谱分析法(mass spectrometry)。

三、利用多标记或通用靶标检测细菌性病原体:

多重PCR(multiplex PCR)、基因芯片/微阵列(gene chip/microarrays)、广范围PCR(broad-range PCR)。