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在核酸提取的操作过程中,该如何保持核酸结构的完整性?(微生物 病原微生物的分子诊断)

导语:在核酸提取的操作过程中,该如何保持核酸结构的完整性?属于微生物下的病原微生物的分子诊断分支内容。本篇围绕微生物 在核酸提取的操作过程中,该如何保持核酸结构的完整性?主题,主要讲述核酸的分离和纯化,核酸等方面医学知识。

答:在核酸提取的操作过程中,为保持核酸结构的完整性,应尽量简化操作步骤,减少各种破坏核酸的有害因素:①控制一定的pH范围(pH 4~10),避免过酸或过碱对核酸链中磷酸二酯键的破坏和影响;②高温或煮沸的时间不宜过长,以免对核酸分子造成严重的破坏;③减少物理因素,如高速振荡、搅拌、反复冻溶对核酸分子的降解或机械剪切;④保持一定的离子强度,以维持核酸分子的空间构型;⑤对于耐高温的器械和试剂进行高压灭菌,以避免细胞内、外可能存在的各种核酸酶对核酸一级结构的破坏;⑥在提取的DNA中加入核酸酶抑制剂,包括DNA酶抑制剂和RNA酶抑制剂,以防止核酸的生物降解。