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什么是随机引物PCR,有何特点?(微生物 医院感染管理方法学进展)

导语:什么是随机引物PCR,有何特点?属于微生物下的医院感染管理方法学进展分支内容。本篇围绕微生物 什么是随机引物PCR,有何特点?主题,主要讲述感染源鉴定方法等方面医学知识。

答:随机引物PCR是Williams和Welsh等于1990年建立了一种基于PCR的基因分型方法,分别称为随机扩增多态性DNA(RAPD)和随机引物PCR(AP-PCR)。两者在本质上是相同的,一般选用9~10bp任一指定引物,随机扩增目标DNA,其退火温度一般较低,为25~35℃。RAPD正是运用其引物的“短”、“单一”和“非特异性”,扩增条件的“非严格性”,使之在庞大的基因群中较容易地找到基本互补的区段并与之结合,最后以扩增条带的大小和数目来确定两种基因组DNA之间的联系。PRAD方法简单、快速、效率高,可在没有对物种进行任何分子生物学研究的情况下对其进行DNA多态性分析,已成功运用于多种细菌的分型等。RAPD唯一的不足是重复性不佳,容易受到包括模板DNA质量、引物浓度、MgCl浓度、热循环操作条件和其他参数等因素轻微改变的影响,故推广应用受到较大限制。