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什么是单链构象多态性?(微生物 医院感染管理方法学进展)

导语:什么是单链构象多态性?属于微生物下的医院感染管理方法学进展分支内容。本篇围绕微生物 什么是单链构象多态性?主题,主要讲述感染源鉴定方法等方面医学知识。

答:单链构象多态性分析(single strand conformation polymorphism,SSCP)是由Orita等于1989年首先建立的分析核酸(DNA和RNA)有无变异的方法。其基本原理是单链核酸在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率与核酸的一级结构和构象密切相关。核酸序列中的任何变异,甚至是单个碱基的改变,都可能改变核酸片段的构象,从而改变其电泳迁移率,借此区分变异与正常的DNA。同样,这种方法也可用于区分不同的细菌株。通常先对目的DNA进行聚合酶链反应(PCR)扩增(PCR-ssCP),再用加热变性或碱变性方法,使扩增产物中双链DNA变性为单链DNA(ssDNA),加入变性上样液后进行非变性聚丙烯酰胺电泳。此方法不需进行序列分析就能区分不同的DNA,较为简单和经济。缺点是影响因素较多,结果重复性差,需熟练的经验,故尚未得到普遍使用。