多重PCR检测质粒VRE的步骤？(微生物 耐药基因的检测)
导语：多重PCR检测质粒VRE的步骤？属于微生物下的耐药基因的检测分支内容。本篇围绕微生物 多重PCR检测质粒VRE的步骤？主题，主要讲述肠球菌等方面医学知识。
答：①细菌总DNA抽提：将细菌接种在LB液体培养基中，35℃摇床过夜。取1.5ml菌液倒入Eppendorf管中，12 000r/min离心5分钟，弃上清液，用100μl裂解液（内含25μg溶菌酶）将细菌重悬，混匀，37℃孵育30分钟，100℃水浴2分钟后，加入等体积的Tris2饱和重蒸酚和氯仿，混匀，12 000r/min离心5分钟后，收集水相备用。②PCR反应条件：95℃预变性5分钟，94℃ 1分钟，56℃ 1分钟，74℃1分钟，共35个循环，延伸5分钟，扩增产物加入2%的琼脂糖凝胶，在80mV电压下电泳2小时，然后在透射紫外仪下照相观察。③PCR反应引物见表：
多重PCR检测VRE的引物