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如何检测某一类ESBLs?(微生物 耐药基因的检测)

导语:如何检测某一类ESBLs?属于微生物下的耐药基因的检测分支内容。本篇围绕微生物 如何检测某一类ESBLs?主题,主要讲述超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),β-内酰胺酶,ESBL等方面医学知识。

答:每一类ESBLs,可设计一个通用引物进行PCR检测,实际检测时可以参照部分文献中提供的引物,常用的引物见下表。PCR体系:50μl,其中buffer 5μl,dNTP 4μl,引物各0.25μl,聚合酶0.25μl,双蒸水38.25μl,模板2μl。反应条件:94℃ 5分钟,94℃ 45秒,42~52℃ 45秒,72℃ 1分钟,72℃ 7分钟,4℃保温。PCR产物电泳:2%琼脂糖胶,80V,电泳1小时。在成像仪上拍照。

PCR引物序列及扩增片段长度