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重要的鉴定非发酵菌的试验有哪些?(微生物 革兰阴性菌)

导语:重要的鉴定非发酵菌的试验有哪些?属于微生物下的革兰阴性菌分支内容。本篇围绕微生物 重要的鉴定非发酵菌的试验有哪些?主题,主要讲述非发酵菌等方面医学知识。

葡萄糖利用:鉴定非发酵菌的OF糖管,蛋白胨∶糖比例为1∶5,而发酵菌蛋白胨∶糖比例为1∶2。因此,在常规工作中,不能用肠杆菌科的发酵糖管鉴定非发酵菌。减少蛋白胨的量,增加糖的量都是为了有利于非发酵菌产生的少量酸的检出。在常规工作中要注意的是OF试验有局限性,缓慢生长的非发酵菌有时培养几天也不产生颜色的改变,有些细菌分解蛋白胨产生碱可使酸中和而不出现颜色反应,因此,OF糖管的质量以及规范的操作都是必需的。

动力:非发酵菌为需氧菌,只在培养基表面生长,因此,常用的半固体并不适合做非发酵菌的动力试验。如果用半固体观察非发酵菌的动力,只需穿刺在培养基顶部4mm左右,并且培养4~6小时首次观察结果。延长时间,这种现象将消失。大多数非发酵菌在培养早期呈现微弱模糊状生长现象,提示有动力。24小时和48小时后再次观察结果,有助于检测缓慢生长的菌株的动力。25℃培养有助于提高某些菌株的动力。湿片法是观察非发酵菌的较好方法,但由于这种方法需要丰富的实践经验,因此,初学者用该法往往容易出错。鞭毛染色是不错的选择。

色素形成:非发酵菌的色素对辅助鉴定很有价值。非水溶性色素有类胡萝卜素、紫色杆菌素等。这些色素可使菌落呈现特征性的颜色。水溶性扩散性色素有绿脓素、青脓素、红脓素、黑脓素等。可使培养基的颜色发生改变。另外,培制培养基时,提高镁离子、硫酸盐的浓度可促使色素的形成。

脲酶:为了使结果快速出现,可加大接种量。应当选用营养丰富尿素培养基。有时在培养基顶部出现微弱延迟的粉红色,不能当作阳性,这其实可能是非特定氨基酸的降解所致。

硝酸盐还原:非发酵菌还原硝酸盐与肠杆菌科细菌还原硝酸盐的原理一样。在观察结果时,如果加试剂后颜色不变,则可能是硝酸盐未被还原或还原的亚硝酸盐继续分解形成其他化合物或氮气所致。此时,可在培养基中加少量锌粉,若出现红色说明硝酸盐仍然存在,结果为阴性;若仍未变红,说明亚硝酸盐被还原成其他化合物(通常是氮气),结果为阳性。

吲哚试验:有些非发酵菌产生的吲哚太少,需要在培养基表面滴加少量二甲苯或氯仿抽提一下。必须注意的是只能加少量,否则会稀释培养基降低吲哚的浓度,降低Ehrlich或Kovac试剂的敏感度。在培养基表面(或抽提物表面)与试剂的接触处呈现玫瑰红色者为阳性。食酸丛毛单胞菌可形成特征性的橘黄色吲哚反应,这不是真正的吲哚形成,而是由色氨酸形成了邻氨基苯甲酸所致。以上为常用的鉴定非发酵菌的试验,在工作中其实还有很多其他的试验,必要时可选用并不断积累经验。