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何为裂解酶片段长度多态性分析(CFLP)?有何特点?(微生物 医院感染管理方法学进展)

导语:何为裂解酶片段长度多态性分析(CFLP)?有何特点?属于微生物下的医院感染管理方法学进展分支内容。本篇围绕微生物 何为裂解酶片段长度多态性分析(CFLP)?有何特点?主题,主要讲述CFLP,裂解酶等方面医学知识。

答:裂解酶Ⅰ是一种热稳定酶。核酸在95℃变性后,当温度降至50~60℃时,被分开的单链DNA与互补链结合之前自身形成特定的发夹圈,产生许多由非配对单链区域连接的茎环结构。裂解酶Ⅰ即识别这种茎环结构,在单链和双链交界区切断5′端第一个配对碱基。理论上,任何经过处理的单链DNA代表了所有可设想的单链构象。在裂解反应中,5′端被标记的PCR产物经酶部分消化后,反应体系中便可含有任何可能的消化产物。这便是CFLP(cleavase fragment length polymorphism)的应用原理。CFLP曾用于HCV基因分型,但不同实验室之间的重复性较差。例如同样用CFLP研究HCV,Marshall得到的图形与Sreevatsan显著不同。此外,CFLP结果解释较难,操作烦琐,这也限制了它的应用。